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單細胞懸液制備|細胞懸液活率偏低的常見原因~
技術文章 2025-02-11

  經(jīng)常制備單細胞懸液的科研人員常會遇到這樣的困擾:即便嚴格遵循既定步驟操作,制備出的單細胞懸液活率卻依舊偏低,這背后究竟隱藏著哪些不為人知的原因呢?


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  細胞懸液活率偏低相關原因的介紹:

  

  1、酶的影響

  

  用不同消化酶制備單細胞,活率是不同的。如果酶的消化能力較低,容易消化不充分,殘留的細胞團會影響細胞活性;如果酶的消化能力很強,容易消化過度,損傷細胞膜,造成細胞活率偏低,因此,合適的消化酶至關重要。

  

  2、時間把控

  

  細胞離體時間越久,死亡率越高,找到合適的酶,短時間內(nèi)制備好,細胞活率較高;時間過短時,組織還沒消化好,活率也是不佳的,要探究合適的消化時間。

  

  3、樣本取材

  

 ?、俳M織類型:神經(jīng)、胰腺等一些組織細胞間連接緊密,細胞脆弱,分離時易受損,如果組織受損,盡量避開損傷部位取材。

  

 ?、诮M織處理:組織血液較多時,要多次清洗,洗掉表面粘連的紅細胞;組織本身血液較多時,做完后要裂紅,避免紅細胞碎片影響細胞活率。

  

 ?、蹣颖颈4媾c運輸:保存時間過長、溫度不適或運輸過程震蕩等,會使細胞缺氧、代謝異常,活性下降。

  

  4、操作環(huán)境與人為因素

  

  ①無菌操作:操作過程中微生物污染,會與細胞競爭營養(yǎng)、產(chǎn)生毒素,導致細胞死亡。

  

  ②操作熟練度:操作人員技術不熟練,增加細胞在體外的暴露時間,使細胞活性受損。

  

  上海凈信的單細胞懸液制備儀,可有效避免以上原因,搭配專屬的消化酶試劑盒,能夠根據(jù)不同的實驗需求精準選擇最適宜的消化酶。簡化了操作步驟,操作簡單,每一款儀器都經(jīng)過大量的實驗驗證,精準匹配最佳程序,顯而易見的提升制備的單細胞活率與得率,提高實驗的整體效率。

  

  單細胞懸液制備儀應用的實驗案例展示:

  

  案例一:

  

  小鼠脾臟單細胞懸液制備

  

  臺盼藍染色、細胞計數(shù)儀計數(shù)

  

  細胞活率99%

  

  小鼠脾臟


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  案例二:

  

  小鼠肺單細胞懸液制備

  

  PI染色,流式分析結(jié)果

  

  細胞活率98.67%

  

  小鼠肺


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  案例三:

  

  小鼠肝單細胞活率

  

  臺盼藍染色,細胞計數(shù)儀局部圖片

  

  小鼠肝


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  案例四:

  

  小鼠胰腺單細胞懸液

  

  細胞計數(shù)儀檢測報告


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  儀器展示:


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  上海凈信現(xiàn)有JX-DLDXB和JX-CKSM兩款儀器可供選擇。JX-DLDXB款專為處理量大的實驗場景設計,其每個管道均可獨立運行,輕松應對大規(guī)模的單細胞制備任務;而JX-CKSM款則完美契合臨床穿刺等特殊實驗需求,雖然每管處理量相對較少,但卻能實現(xiàn)高效的批量處理,為單細胞制備提供強大助力。


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